倒置熒光顯微鏡的濾色系統(tǒng)和照明選擇

　　在倒置熒光顯微鏡中，熒光光源裝置是提供一定波長(zhǎng)的激發(fā)光使標(biāo)本受激發(fā)射熒光，再通過(guò)顯微鏡的物鏡，B鏡系統(tǒng)使熒光圖象放大以供觀察，因此，一般來(lái)說(shuō)，任何顯微鏡都可以用于熒光顯微術(shù)。
 

　　濾色系統(tǒng)是熒光顯微鏡的重要部分，它由激發(fā)濾片(第一相片)和抑制濾片(第二濾只)所組成。前者提供一定波長(zhǎng)范圍的激發(fā)光，后者提供相應(yīng)波長(zhǎng)范圍的熒光。其玻片通常用有色玻璃組成。其型號(hào)各國(guó)均不相同。
 

　　熒光顯微鏡激發(fā)濾片根據(jù)光源和熒光色突的特點(diǎn)，可分為露外光激發(fā)濾片，紫氏光激發(fā)濾片和紫外藍(lán)光激發(fā)濾片。熒光顯微鏡所需激發(fā)濾片的厚度，主要根據(jù)所用顯微鏡激發(fā)方式而定，暗場(chǎng)熒光顯微術(shù)要求激發(fā)濾片薄一些，明場(chǎng)時(shí)則要求厚一些，因?yàn)槭褂冒祱?chǎng)時(shí)激發(fā)光不會(huì)按進(jìn)入物鏡，另外還得考慮標(biāo)本情況和目的性，基本原則是以獲得明亮的熒光相更好的背景襯托為準(zhǔn)。
 

　　熒光顯微鏡抑制濾片的選擇，主要根據(jù)激發(fā)濾只而定。其原則是以*吸收激發(fā)光為目的，透過(guò)任何可見(jiàn)光(*互補(bǔ))以保護(hù)眼睛不受紫外光的刺激和損害。為與激發(fā)濾片相對(duì)應(yīng)，抑制濾片也可分為：紫外光抑制濾片、紫藍(lán)光抑制濾片和紫外驗(yàn)光抑制濾址。
 

　　上面介紹了倒置熒光顯微鏡的濾色系統(tǒng)后，再來(lái)了解下倒置熒光顯微鏡的照明選擇根據(jù)什么來(lái)考慮。
 

　　熒光顯微鏡的照明可根據(jù)聚光器的構(gòu)造和激發(fā)光的波長(zhǎng)按以下三點(diǎn)考慮：
 

　?、?gòu)臒晒庀竦姆床钜髞?lái)看，UV激發(fā)暗場(chǎng)聚光器照明更好。
 

　　②以像的亮度來(lái)考慮，BV激發(fā)濾光片暗場(chǎng)觀察效率更高。
 

　　③UV激發(fā)濾光片暗場(chǎng)觀察和BV激發(fā)暗場(chǎng)聚光器照明的特性，可看作介于這兩種照明方法之間，但前者濾光片暗場(chǎng)的性質(zhì)較強(qiáng)，顯示圖像較明亮，反差小;后者因保留暗場(chǎng)光路的性質(zhì)，故顯示圖像較暗，而反差有所改善。當(dāng)實(shí)際使用熒光顯微鏡時(shí)，應(yīng)采用更適合標(biāo)本要求的照明法進(jìn)行觀察。