使用顯微鏡拍照時怎樣設置數(shù)值孔徑與光強度

在使用顯微鏡的時候，因為不是視頻顯微鏡，不能即時保存圖片，往往是需要直接拍照的，那么在使用顯微鏡拍照的時候需要怎么弄呢？該如何設置數(shù)值孔徑與光強度呢？今天沃德普儀器給大家介紹一下在使用顯微鏡時，需要拍照的時候，怎樣設置數(shù)值孔徑跟光強度，才可以拍出合適的照片。

現(xiàn)在一般使用的感光膠片，在一定的曝光時間范圍內(nèi)，像的亮度與所需曝光時間呈反比關(guān)系。只要合適的曝光量不變，就能得到正確曝光的底片，這種原理稱為倒易律法則。自動曝光控制器正是通過倒易律法則根據(jù)像的亮度確定曝光時間的。

但是顯微鏡如果曝光時間超出這一范圍。顯微鏡特別是當由于像的亮度太低而使用待別長的曝光時間時，倒易律法則就失去效用，如果用自動曝光控制器所測定的時間進行曝光，底片會出現(xiàn)曝光不足的現(xiàn)象，看起來似乎膠片的感光速度變得低于它原來的速度，例如當膠片上的光強度(即像的亮度)降至一般光強度的1/50時，顯微鏡原來的Z佳曝光時間將不是延長50倍，而是延長100倍或更長，這種現(xiàn)象被稱為倒易律失效，尼康顯微鏡主要是由照相材料的特性所決定的。這個效應在彩色顯微照相中更為明顯。        

當然，在亮度較低的黑白顯微照相中也會遇到。在有些新型的自動曝光控制器上，已經(jīng)設計有倒易律失效的矯正盤，并且附有一張用于各種類型膠片的矯正指數(shù)表。在進行顯微攝影時根據(jù)所用膠片的型號和曝光速度，查出矯正指數(shù)，顯微鏡然后把曝光控制器上的旋鈕旋到該指數(shù)刻度，數(shù)碼顯微鏡就可對倒易律失效進行有效地矯正。從中可以看出，矯正指數(shù)不僅與膠片的型號有關(guān)，而且主要與膠片的感光速度有關(guān)。膠片的感光速度愈高，所用的矯正指數(shù)愈大，也就是說倒易律失效的影響愈大。關(guān)于各個矯正指數(shù)對于曝光時間的影響及矯正情況，可以看出，矯正指數(shù)愈大，表明對膠片曝光時間的矯正幅度愈大。例如，當矯正指數(shù)為2時，矯正后的曝光時間為原來的2.26倍;當矯正指數(shù)為6時，矯正后的曝光時間則為原來的11.6倍。     

提示：現(xiàn)在所使用的許多自動顯微攝影裝置都沒有用倒易律失效的矯正盤，有時當不可避免地采用較長的曝光時間時，根據(jù)所用膠片的性能查出矯正指數(shù)，然后中找出相應的曝光時間矯正值，從而通過自動曝光控制器上的膠片速度選擇盤或補償器延長曝光時間，顯微鏡使倒易律失效得到矯正。     

除了上面所敘述因素以外，還存在著一些其他的情況，當然在這些情況下自動曝光控制器無疑對于尋找正確的曝光時間是有很大的幫助，盡管這樣，一些實際經(jīng)驗對于顯微攝影仍然是必需的。特別是在沒有自動曝光控制器和曝光表的情況下，或者使用暗視野或熒光顯微鏡進行顯微照相時，顯微鏡就B須在實驗曝光的基礎上尋找正確的曝光時間，一般從一個Z短的，顯微鏡光時間開始每次增加一倍。例如采用1s, 2s, 1 s, 2 s, 4 s, 8 s, 16s等時間，通過一系列底片的曝光，尋找Z佳的曝光時間。在進行這樣的一系列曝光時，B須小心地保持顯微鏡裝配和照明等一切條件不發(fā)生變化。    

由于曝光時間與光的強度(表現(xiàn)為像的亮度)成反比，任何影響光強度的因素都將影響曝光時間。在實踐中一個Z容易發(fā)生的錯誤是，當一個正確的曝光時間已經(jīng)用曝光表測定后，在曝光之前顯微鏡工作者又重新精細地調(diào)節(jié)了集光器光闌，顯微鏡這就導致了膠片的不正確的曝光。金相顯微鏡在照相中當照明調(diào)節(jié)及其他條件保持不變，而只是更換了物鏡或目鏡時，新的曝光時間可以通過光強度的計算而進行估計。由于光的強度與有效數(shù)值孔徑商的平方，以及與總放大倍數(shù)商的平方成比例，顯微鏡因此第2次曝光時間(ETI)可以從第1次曝光時間(ETI)中得出式中:N.A.I和N.A. I分別是第1次和第2次曝光時物鏡的有效數(shù)值孔徑;Vi和VI分別是第1次和第2次曝光時顯微鏡的總放大倍數(shù)。當然以這種方法計算的曝光時間只是一個近似值，因為集光器孔徑上的任何變化都會影響物鏡孔徑的有效利用。

顯微鏡想獲得清晰的顯微圖像，除了有熟練的技術(shù)之外，一臺好的合適的顯微鏡也是不能缺少的，只有硬件與軟件上的相互配合才可以更好的得出想要的圖像。沃德普儀器自成立以來，致力于視頻顯微鏡、LCD檢查顯微鏡、LED顯微鏡環(huán)形燈、顯微鏡測量軟件的市場開發(fā)與客戶配套方案解決，積累大量用戶體驗經(jīng)驗。